Артемия из воды
Автор Леонов С.А., 26 дек 2008 21:52
Сообщений в теме: 52
#1
Отправлено 26 декабря 2008 - 21:52
Водил носом по морскому аквариумному форуму и споткнулся взглядом на одну тему. Так как времени на работе особо не было, то пробежался по-быстрому. Потом уже не нашёл.
Но. Рассказывалось, как готовилась в самодельном фитореакторе культура фитопланктона. А делалась она (если правильно помню) из воды, размороженной с артемии. Ведь замораживают-то "живьём", прям в той воде, в которой выловили, а значит, и фитоорганика должна там быть. И вот каково было удивление "повара", когда увидел в фитореакторе наупулиусы артемии, которые позже выросли, питаясь родным размноженным фитопланктоном и даже дали потомков. Кажется там же ему ответили, что в принципе, ничего удивительного. Ведь артемия замороженная взрослая а значит, многие уже я яйцами.
Вот кто что думает по этому поводу? Действительно ли можно купить замороженную крупную артемию и оттаяв её, получить наупулиусы?
Но. Рассказывалось, как готовилась в самодельном фитореакторе культура фитопланктона. А делалась она (если правильно помню) из воды, размороженной с артемии. Ведь замораживают-то "живьём", прям в той воде, в которой выловили, а значит, и фитоорганика должна там быть. И вот каково было удивление "повара", когда увидел в фитореакторе наупулиусы артемии, которые позже выросли, питаясь родным размноженным фитопланктоном и даже дали потомков. Кажется там же ему ответили, что в принципе, ничего удивительного. Ведь артемия замороженная взрослая а значит, многие уже я яйцами.
Вот кто что думает по этому поводу? Действительно ли можно купить замороженную крупную артемию и оттаяв её, получить наупулиусы?
Синяя обезьяна в кокошнике - это круто, свирепо и гламурно в одном разе!
#3
Отправлено 26 декабря 2008 - 23:03
#5
Отправлено 28 декабря 2008 - 00:33
не переживай, у артемии очень слабое пищеварение, у нее в пищеводе очень много чего сохраняется. Пэтому для закваски воды именно мороженная артемия просто шикарна
#7
Отправлено 28 декабря 2008 - 18:36
Не, не опередю
не вижу замороженную артемию...порази уже всех!!!!
#9
Отправлено 28 декабря 2008 - 20:16
балин.........ахаххахахааа......ну давай в инете закажем!!!! хватит ужо отмазываться! я уже и ведро приготовила.....посылку с яйцами встречать
#12
Отправлено 28 декабря 2008 - 21:52
Хих....яснее надо объяснять батюшка! надо было сказать что про морскую говоришь! я думала у вас там бабульки всю соль поскупили в подготовке к кризису
а пищевой морской тож не видал? может она и не намного хуже аквариумной?
#14
Отправлено 28 декабря 2008 - 22:49
ну она пищевая стоит 50р за кг...это я ее 2 года назад так покупала! так что может и ниче
...ну вот я в одну банку засыпала морскую пищевую...и посмотрим в какой лучше будут артемии
..хотя неплохо бы еще конечно с морской аквариумной поставить баночку...
#16
Отправлено 02 января 2009 - 18:20
А вот и подтверждение моих догадок насчёт соли:
Автор: Diane Walstad
Издание: журнал Tropical Fish Hobbyist 2006/11
Влияние токсичных металлов и на выклев науплиев артемии
Диана Вальстад
Фотографии автора
Сокращенный перевод (Оригинал статьи на английском языке)
Введение
В большинстве инструкций по выведению науплий артемии любителю рекомендуется закладывать в инкубатор значительные дозы яиц каждый день или через день, применяя каждый раз свежий солевой раствор. Это приводит к нерациональному использованию дорогостоящих яиц, приготовлению больших объемов солевого раствора, а также тому, что и малькам рыб скармливается значительно больше науплий, чем они могут съесть.
Мой метод был разработан для любителей, которым изредка приходится вскармливать около 50 - 100 мальков в течение одного-двух месяцев. Я использую цисты очень экономно и многократно использую отработанный солевой раствор. Я также подкармливаю науплий, в результате чего содержание белка и их пищевая ценность возрастает после выклева, а не уменьшается, как при пользовании традиционной методикой. Применение моего метода упрощает процесс выведения науплий артемии и удешевляет эту процедуру.
Воздействие токсичных металлов никогда не упоминалось ранее при описании других методик выклева науплиев. Однако два из распространенных токсичных металлов (медь и цинк) часто присутствуют в водопроводной воде в концентрациях, которые могут иметь серьезное влияние на выклев науплий Артемии. У меня есть подозрения, что причиной плохого выклева науплий часто является именно присутствие токсичных металлов.
Выклев науплий из цист артемии
Я до сих пор пользуюсь цистами артемии, которым теперь свыше 16 лет. Я храню баночку с цистами в морозильнике для того, чтобы обеспечить лучшую сохранность. Перед вскрытием я даю ей прогреться до комнатной температуры, чтобы избежать конденсации паров воды из воздуха, которая может привести к ускоренной деградации цист в дальнейшем.Согласно моим рассчетам выклев из этих цист 16-летней давности составляет около 40 процентов.
Корм для артемии
Для подкормки может использоваться любой корм с высоким содержанием протеина, который может привести к бактериальной вспышке. В качестве корма можно использовать рисовые отруби, детское питание, пивные дрожжи, пекарские дрожжи, бактерии, и микроводоросли. Качество пищи играет значение, если вы будете выращивать артемию до взрослого возраста либо если она будет скармливаться холодноводным морским животным которым требуется высокое содержание омега-3 жирных кислот (Dhont и Sorgeloos, стр. 251-271).
Обычный любитель, выкармливающий несколько десятков мальков гуппи или цихлид, может использовать все что угодно в качестве корма для науплий артемии. Я применяла, с хорошим результатом, пекарские дрожжи, сухой порошкообразный корм для мальков, муку бобовых, а также порошок спирулины.
Аэрация
Цисты артемии будут выклевываться и без аэрации, но науплиям требуется кислород. Я пользуюсь несильной аэрацией (с пузырями большого размера), так, чтобы цисты не выбрасывало выше уровня воды и чтобы науплии не теряли энергию на постоянную борьбу с течением. (Я заметила. Что науплии часто собираются у дна, где течение минимально.)
Температура
В большинстве рецептов для успешного выклева науплий артемии рекомендуется температура выше 26°C. При температуре от 26-30°C цисты выклевываются за ночь. При 18°C они также выклевываются, но процесс занимает 2-3 дня. При этом не все цисты выклевываются одновременно, особенно в холодной воде. (Думаю, многие любители выбрасывают доброкачественные цисты, если они не проклевываются быстро.)
Я советую просто держать инкубатор при комнатной температуре. В прохладной воде науплии артемии будут расти медленнее и проживут дольше. Это не так уж и плохо.
Соленость и pH
Выклев цист артеми лучше происходит в воде с низкой соленостью. Соленость? Превышающая соленость морской воды (3.5%) подавляет выклев (Dwivedi et al., стр. 175-183). Для инкубации артемии я использую соленость как в морской воде и pH 8 - 8.5.
Соль
Для выклева науплий артемии вполне подходит сочетание нейодированной столовой соли (NaCl) и небольшого количества питьевой соды (NaHCO3), которая помогает поднять pH выше 8. Тем не менее, я пользуюсь морской солью. Морская соль сама по себе стабилизирует pH на уровне 8.3, а также содержит больше питательных веществ (калий, магний, кальций, сульфаты, и пр.), что, вероятно, более благоприятно для науплий артемии а также способствует созданию более естественной бактериальной микрофлорв. Поскольку я многократно использую солевой раствор, затраты на приобретение морской соли незначительны. Двухкилограммовый мешочек соли, который я купила в свое время, служит мне вот уже 15 лет.
Кондиционер для воды
Я бы не стала выводить науплии артемии без применения подходящего кондиционера, способного нейтрализовать тяжелые металлы. Я применяю кондиционер в рекомендованной производителем дозировке.
Влияние токсичных металлов на выклев науплиев артемии
Тяжелые металлы, такие, как свинец, медь, ртуть и цинк, влияют на жизнедеятельность животных организмов и растений. Содержание металлов, которые высокотоксичны для человека, регулируется в законодательном порядке, поэтому наврядли вы обнаружите свинец или ртуть в водопроводной или питьевой воде. Однако цинк и медь, которые относительно безвредны для человека, иногда присутствуют в водопроводной воде в токсичных для водных организмов концентрациях (Walstad, стр. 91-113). Поэтому медь и цинк это те два тяжелых металла, о содержании которых аквариумисту стоит задумываться.
Выклев науплий артемии чрезвычайно чувствителен к содержанию тяжелых металлов (MacRae и Pandey, стр. 247-252). Как видно на Рис. 1, содержание всего 0.0064мг/л меди снижает выклев более чем на 50 процентов. То есть, в течение 72 часов в контроле выклюнулось 65 процентов цист, в то время как в воде с содержанием 0.0064мг/л меди выклюнулось только 30 процентов цист. Среднее содержание меди в муниципальной воде составляет 0.008мг/л ( <0.001 и вплоть до 0.3мг/л) (Walstad, стр. 85).
По сравнению с медью цинк менее токсичен, однако тоже способен в значительной степени препятствовать выклеву науплий артемии. На Рис. 1 видно, что 0.065мг/л цинка снижает выклев примерно на 50 процентов. То есть, в течение 72 часов в контроле выклюнулось 63 процентА цист, в то время как в воде с содержанием 0.065мг/л ЦИНКА выклюнулось 35 процентов цист.
Рисунок 1: Влияние меди и цинка на выклев артемии
Графики показывают влияние двух тяжелых металлов, в трех различных дозах, на выклев науплиев артемии. Каждая точка на графиках является усреднением по четырем измерениям. Измерения проводились в чашках Петри, содержащих 25 цист в 5мл среды. Цисты были гидрированы заранее путем вымачивания в течение 6 часов в холодной дистиллированной воде. В дальнейшем производился отбор качественных цист – плавающие на поверхности и негидрированные цисты в эксперименте не участвовали. Выклев цист в чашках Петри контролировался в течение 8 равных интервалов времени за общий период в 72 часа. (Thomas MacRae).
Влияние токсичных металлов на водные растения
Я впервые столкнулась с токсичностью металлов в водопроводной воде при экспериментах с аквариумными растениями. Bacopa caroliniana, населяющая болота Кароины с мягкой водой, хорошо росла в моей водопроводной воде. В противоположность бакопе, анахарис (Egeria densa) рос очень плохо. Вообще, растения происходящие из жестких вод особенно чувствительны к содержанию тяжелых металлов (Walstad, стр. 17, 18, 115). У меня закралось подозрение, что анахарис, происходящий из водоемов с жесткой водой, может быть чувствителен к содержанию цинка в моей водопроводной воде. В моей воде (из колодца) содержится 0.8мг/л цинка. Эта значительно больше, чем средний уровень 0.003мг/л чем в водопроводной воде (Walstad, стр. 85). По всей видимости, высокое содержание цинка в моей воде является результатом применения оцинкованных деталей в трубах и насосе, качающем воду из колодца.
Я решила проверить, действительно ли токсичность цинка является источником проблем с ростом анахариса. Хелатор металлов EDTA связывает цинк (и другие тяжелые металлы) очень крепко, в 790,000 раз крепче, чем кальций (Walstad, стр. 17). Поскольку токсическое действие проявляют только свободные, несвязанные металлы, EDTA способна нейтрализовать токсичное действие металлов. Я решила проверить, способен ли EDTA защитить анахарис от действия цинка, содержащегося в моей водопроводной воде. На Рис. 2 видно, что EDTA действительно защитил анахарис. Когда к водопроводной воде была добавлена EDTA у анахариса был нормальный рост. Средний прирост биомассы в трех банках с EDTA составил 130 процентов. Без EDTA у растений наблюдалось в среднем 8-процентное снижение биомассы.
Рисунок 2: Влияние EDTA на рост растений в водопроводной воде
Я использовала 2-литровые бутылки из под минеральной воды с отрезанными горлышками. В каждую бутылку я добавила чашку глинистой почвы (удобренной фосфатами) и чашку песка. Я посадила три 10-сантиметровых кусочка анахариса Egeria densa и сменяла водопроводную воду несколька раз пока не пройдет муть. Затем я осторожно добавила 1.5 литра водопроводной воды удобренной 0.5мг/л аммония (моя жесткая водопроводная вода содержит большое количество минералов, таких как кальций, калий и пр., а земля дает фосфаты и микроэлементы – железо, марганец, и т.д.). В три бутылки я добавил маточный раствор EDTA (0.2 M, pH 7.4) до концентрации 0.025 mM EDTA. Я предположила, что количество EDTA было достаточно для того? Чтобы нейтрализовать 0.8мг/л (0.012 mM) цинка. Три контрольные бутылки были подготовлены таким же образом, за исключением того, что EDTA не добавлялся. Бутыли стояли на балконе в течение 18 дней в июне. На фотографии показаны две типичные бутыли. Затем я достала растения, высушила их, взвесила, и рассчитала прирост биомассы.
Для того, чтобы убедиться, что именно цинк (а не какой-нибудь другой металл) является источником проблемы, я провела дополнительный эксперимент чтобы проследить, как анахарис отреагирует на увеличение содержания цинка в питательной среде. Результаты (Рис. 3) что рост анахариса подавлялся при уровне цинка близком к моей водопроводной воде (0.8мг/л). Даже при содержании цинка 0.1мг/л растения продемонстрировали замедление роста и укорочение длины листа. При содержании цинка 0.5 и 2.0мг/л рост затягивался, а листья бурели и распадались.
Рисунок 3: Влияние цинка на рост растений в питательной среде
Сперва я приготовила типичную питательную среду для растений, добавив в обессоленную воду различные маточные растворы. Окончательная концентрация питательных веществ (в мг/л) была: 1.6 N, 16 K, 30 Ca, 5.6 Mg, 7.5 S, 22 Na, and 60 HCO3. В каждую 2-литровую бутыль я добавила чашку глинистой почвы (удобренную фосфатами) и чашку песка. Я посадила 10-сантиметровые кусочки анахариса Egeria densa и добавляла и сменяла обессоленную воду пока не пройдет муть. Затем я осторожно добавила 1.5 литра питательной среды. Наконец, я добавила небольшие дозы маточного раствора цинка для получения концентрации в 0.1, 0.5, и 2.0 мг/л цинка. Фотографии показывают прирост биомассы, бутылки стояли на балконе в течение 16 дней в июне.
Нейтрализация токсичных металлов в солевом растворе для науплиев
Есть несколько способов нейтрализации токсичных металлов при инкубации артемии. Аквариумисты могут использовать для приготовления солевого раствора очищенную воду (обессоленную либо осотическую). Можно однако использовать водопроводную воду, в которую был добавлен кондиционер для аквариумной воды. EDTA также защищает науплии артемии от токсичных металлов, содержащихся в водопроводной воде.
И наконец, можно многократно использовать приготовленный однажды солевой раствор, оставшийся после того, как науплии были выведены и использованы. Старый солевой раствор, часто имеющий легкий желтоватый оттенок, содержит растворенные органические вещества. Растворенная органика является продуктом длительной переработки бактерпиями пищи, вносимой для науплиев, невыклюнувшихся цист, и пр. На Рис. 4 показаны два типичных инкубатора, один со свежеприготовленным солевым раствором, и другой со старым солевым раствором. В бутыли со старым солевым раствором выклюнулось большое количество здоровых рачков. В новом солевом растворе выклев науплиев произошел с задержкой и процент выклева был очень низким. Образцы воды, рассмотренные под фазовым микроскопом, выявили наличие большого количества мертвых или погибающих науплиев.
Рисунок 4: Свежий и старый солевые растворы
Одна из 1.5 литровых бутылей была заполнена свежим солевым раствором. Я заполнила другую бутылку старым солевым раствором (который использовался многократно для выклева артемии в прошлом году), немного использованного грунта, и старое платмассовое растение. К каждой бутыли я добавила 1/8 чайной ложки (680 мг) цист артемии и 1/8 чайной ложки (340 мг) измельченного корма для рыб. Бутыли хранились в в слабоосвещенной комнате при температуре около 18° - 21°C. На фотографии изображены бутылки через четыре дня. Выклев в свежем солевом растворе занял четыре дня и был очень низким. Выклев в старом солевом растворе занял два дня и был замечательным — достаточно науплиев, чтобы прокормить 50 - 100 мальков в течение недели. При ближайшем рассмотрении бутыли со старым солевым раствором видны здоровык, растущие рачки, похожие на красное облачко. У них ярко-красный цвет благодаря повышенному содержанию гемоглобина при низком содержании кислорода, обилии пищи и адекватном содержании железа (Versichele и Sorgeloos, стр. 231-246).
Органика, содержащаяся в старом солевом растворе связывает и нейтрализует тяжелые металлы, подобно тому, как это делает EDTA и органические коллоидные растворы, содержащиеся в кондиционерах аквариумной воды. На Рис. 5 показан инкубатор, а на Рис. 6 видны результаты эксперимента, когда я сравнивала действие старого солевого рпаствора и кондиционера аквариумной воды на токсичные металлы, содержащиеся в воде. В каждой из трех бутылей, содержащих старый соленый раствор либо кондиционер аквариумной воды выклюнулось в среднем по 10,000 науплиев. Даже добавки 20% старого солевого раствора было достаточно для того, чтобы нейтрализовать токсичность моей водопроводной воды. В бутылке, содержащей только свежий солевой раствор выклев был очень низкий - только 1000 науплиев.
Рисунок 5: «Эксперимент К» с артемией
Я заполнила четыре 0,6л. пластиковые бутылки 2 1/2 чашками (около 0.5л.) одного из следующих составов: (1) старый солевой раствор; (2) 20 процентов старого и 80 процентов свежего солевого раствора; (3) свежий солевой раствор с кондиционером аквариумной воды; и (4) свежий солевой раствор. Старый солевой раствор использовался в прошлом для выведенияартемии; он был прозрачен но имел желтоватый оттенок. Я добавила по 70мг цист артемии в каждую бутылку. The На фотографии видны гидрометр, воронка и другие материалы, которые я использовала для эксперимента.
Интересно, что взрослые артемии чрезвычайно выносливы к содержанию тяжелых металлов, гораздо больше, чем большинство рыб. Например, летальная доза меди и цинка для взрослых артемий составляет 2.3мг/л и 63мг/л, соответственно (Trieff, стр. 180). Науплии, которых убивает содержание уже 0.065мг/л цинка (Рис. 1), таким образом, в 1000 раз более чувствительны к содержанию цинка, чем взрослые особи.
Рисунок 6: Результаты «Эксперимента К» с артемией
К концу трехдневного эксперимента я определила жизнестойкость науплиев в каждой бутылке путем отделения по 1мл образца (предварительно хорошо перемешав воду) и подсчета живых рачков в стеклянной пипетке на 1мл. В бутылке справа со свежим солевым раствором был очень плохой выклев (около 1000 науплиев/бут.). В остальных трех бутылках было примерно по 10,000 науплиев.
Запуск культуры артемии
Я приготавливаю солевой раствор в банке емкостью в один галлон (около 3.78л), добавляя 1/2 чашки (130 г) аквариумной морской соли, заполняя ее водопроводной водой (Рис. 5). После того, как соль растворится, я добавляю кондиционер аквариумной воды.
Для получения недельного запаса артемии я наливаю некоторое количество этого солевого раствора в 11/2-литровую пластиковую бутыль. Затем я добавляю 1/8 чайной ложки без горки (340 mg) цист в 11/2-литровую бутыль. Несмотря на низкий (40%) процент выклева моих цист 16-летней давности, этого количества достаточно для выхода примерно 45,000 науплиев. Это довольно много. Применение большего, чем 1/4 или 1/8 чайной ложки количества цист является растратой и приводит к снижению выклева.
Кормление науплиев является важным моментом для моего метода. Оставшись без пищи науплии очень быстро теряют пищевую ценность. Если же их подкармливать, содержание протеина и пищевая ценность возрастает (содержание протеина возрастает с 47 процентов у науплий до 60 процентов у взрослых особей) (Gorospe и Nakamura, стр. 99-107). Я добавляю в бутылку-инкубатор примерно 1/8 чайной ложки сухово порошкового корма (разведенного в суспензию с небольшим количеством воды). На этом корме немедленно произойдет бактериальная вспышка и вода помутнеет (Рис. 4). Науплии будут питаться как самим кормом, также и бактериями.
Небольшого количества внесенного корма хватает надолго. Следует иметь в виду что морские соли, невыклюнувшиеся цисты и сами науплии выделяют питательные вещества и минералы, подпитывающие бактерии. После первоначального кормления обычно не бывает нужды в добавочном внесении корма. Питательные вещества в инкубаторе будут использоваьтся многократно в результате распада и бактериального роста. Если добавить чрезмерное количество корма инкубатор может оказаться перегруженным отходами что приведет к нарушению экологического баланса. Пока вода в инкубаторе обладает легкой замутненностью можно считать, что у науплиев достаточно бактериальной пищи. Возможно, бактерии не являются оптимальной пищей, но они достаточно хороши для первых 7 - 10 дней при культивации артемии.
Обслуживание инкубатора и кормление рыб
11/2-литровая бутылка, заполненная здоровыми, растущими науплиями (как в бутылке со старым солевым раствором, изображенной на Рис. 4) должна спокойно прокормить мальков в течение 7 дней. Дважды в день я сцеживаю здоровых питательных рачков, а оставшихся рачков продолжаю подращивать. Если, по мере роста мальков, потребность в корме увеличивается, иногда я добавляю второй инкубатор и пользуюсь двумя одновременно. Двух инкубаторов бывает вполне достаточно для выкармливания 100 мальков в течение 6 недель, до стадии, когда их можно переводить на другие корма.
После того, как науплии в инкубаторе израсходованы, легко запустить новую партию. Я отфильтровываю старый солевой раствор, переливая его в другой инкубатор (в качестве фильтра я применяю сачок для артемии либо коническую воронку, положив в нее кусок ткани). Ополоснув слегка инкубатор водой я наливаю старый солевой раствор обратно и добавляю 1/8 - 1/4 чайной ложки цист. При необходимости я добавляю немного водопроводной воды взамен испарившейся. Если старый солевой раствор кристально прозрачен, я добавляю также 1/8 чайной ложки корма. Если вода имеет легкое помутнение, я корма не добавляю.
Когда процесс подращивания мальков завершен, я отфильтровываю весь старый солевой раствор в канистру для хранения до следующего раза, когда мне понадобятся науплии артемии.
Зачастую в этой воде накапливается значительная концентрация аммиака (>10мг/л), но я научилась не обращать на это внимания. Я обнаружила, что после пары месяцев хранения аммиак пропадает. Более того, науплии, кажется, практически невосприимчивы к содержанию аммиака. Действительно, летальная доза (LC50 за 24 часа) аммиака составляет 840мг/л (Chen et al., стр. 329-336).
Обсуждение
Выводить науплиев артемии легко, нет необходимости в длительном и трудоемком процессе приготовления свежево солевого раствора. У меня цисты выводятся при различных условиях: слабое освещение, слабая аэрация, соленость в 1 - 31/2 процента, высокое содержание аммиака (>50 мг/л), и в широком температурном диапазоне (18 - 26°C). Цисты могут храниться в морозильнике по крайней мере в течение 16 лет. Науплии очень выносливы, за исключением чрезвычайной чувствительности к тяжелым металлам. Подозреваю, что плохой выклев науплиев зачастую является результатом именно наличия токсичных металлов а не плохого качества цист.
Многократное использование солевого раствора, применяемого для выклева, обладает тонкими преимуществами. Исследования показали что по мере культивации артемии происходят сильные изменения сопутствующей бактериальной микрофлоры (Gorospe и Nakamura, стр. 99-107). Вначале в культуре артемии преобладали бактерии Alteromonas, Vibrio, и Enterobacteriaceae, присущих для сверхсоленой среды естественного обитания артемии. Тем не менее, проведя 2 недели в более благоприятной среде (морская вода с изобилием пищи), в культуре артемии начинают преобладать бактерии рода Pseudomonas. Исследования показали, что в присутствии Pseudomonas продолжительность жизни рачков и их размер увеличиваются. Старый солевой раствор, который я использую для выклева цист артемии, предоставляет более благоприятную для науплиев бактериальную микрофлору, чем свежеприготовленный.
Список цитируемых работ
Chen, J. C.,K.J. Chen,andJ. M. Liao. 1989. Joint action of ammonia and nitrite on Artemia nauplii. Aquaculture 77: 329-336.
Dhont, J. and R Sorgeloos. 2002. Applications of Artemia. In: Abatzopoulos Th. J., J. A., Beardmore, J. S. Clegg, and P. Sorgeloos (eds.). Artemia: Basic and Applied Biology. Kluwer Academic Publishers, Boston, MA. pp. 251-271.
Dwivedi, S. N., S. K. R, Ansari, and M. Q. Ahmed. 1980. Mass culture of brine shrimp under controlled conditions in cement pools at Bombay, India. In: Persoone, G., R Sorgeloos, O. Roels, and E.Jaspers (eds.). The Brine Shrimp Artemia (Vol. 3). Universa Press, Wetteren, Belguim. pp. 175-183.
Gorospe, J. and K. Nakamura. 1996. Associated bacterial microflora in Artemia-rice bran culture. Israeli J. Aquaculture 48: 99-107.
Lavens, P., and R Sorgeloos. 2000. The history, present status and prospects of the availability of Artemia cysts for aquaculture. Aquaculture 181: 397-403.
MacRae, T. H., and A. S. Pandey. 1991. Effects of metals on the early life stages of the Brine Shrimp, Artemia: A developmental toxicity assay. Arch. Environ. Contam. Toxicol. 20: 247-252.
Trieff, N. M. 1980. Toxicity of metals, oils and other organics on Artemia. In: Persoone G., R Sorgeloos, O. Roels, and E. Jaspers (eds.). The Brine Shrimp Artemia (Vol. 1) Universa Press, Wetteren, Belguim. pp 253-262.
Versichele, D., and R Sorgeloos. 1980. Controlled production of Artemia cysts in batch cultures. In: Persoone, G., R Sorgeloos, O. Roels, and E. Jaspers (eds.). The Brine Shrimp Artemia (Vol. 3). Universa Press, Wetteren, Belgium, pp 231-246.
Walstad, D. 2003. Ecology of the Planted Aquarium (A Practical Manual and Scientific Treatise), Second Edition. Echinodorus Publishing, Chapel Hill, NC.
Автор: Diane Walstad
Издание: журнал Tropical Fish Hobbyist 2006/11
Влияние токсичных металлов и на выклев науплиев артемии
Диана Вальстад
Фотографии автора
Сокращенный перевод (Оригинал статьи на английском языке)
Введение
В большинстве инструкций по выведению науплий артемии любителю рекомендуется закладывать в инкубатор значительные дозы яиц каждый день или через день, применяя каждый раз свежий солевой раствор. Это приводит к нерациональному использованию дорогостоящих яиц, приготовлению больших объемов солевого раствора, а также тому, что и малькам рыб скармливается значительно больше науплий, чем они могут съесть.
Мой метод был разработан для любителей, которым изредка приходится вскармливать около 50 - 100 мальков в течение одного-двух месяцев. Я использую цисты очень экономно и многократно использую отработанный солевой раствор. Я также подкармливаю науплий, в результате чего содержание белка и их пищевая ценность возрастает после выклева, а не уменьшается, как при пользовании традиционной методикой. Применение моего метода упрощает процесс выведения науплий артемии и удешевляет эту процедуру.
Воздействие токсичных металлов никогда не упоминалось ранее при описании других методик выклева науплиев. Однако два из распространенных токсичных металлов (медь и цинк) часто присутствуют в водопроводной воде в концентрациях, которые могут иметь серьезное влияние на выклев науплий Артемии. У меня есть подозрения, что причиной плохого выклева науплий часто является именно присутствие токсичных металлов.
Выклев науплий из цист артемии
Я до сих пор пользуюсь цистами артемии, которым теперь свыше 16 лет. Я храню баночку с цистами в морозильнике для того, чтобы обеспечить лучшую сохранность. Перед вскрытием я даю ей прогреться до комнатной температуры, чтобы избежать конденсации паров воды из воздуха, которая может привести к ускоренной деградации цист в дальнейшем.Согласно моим рассчетам выклев из этих цист 16-летней давности составляет около 40 процентов.
Корм для артемии
Для подкормки может использоваться любой корм с высоким содержанием протеина, который может привести к бактериальной вспышке. В качестве корма можно использовать рисовые отруби, детское питание, пивные дрожжи, пекарские дрожжи, бактерии, и микроводоросли. Качество пищи играет значение, если вы будете выращивать артемию до взрослого возраста либо если она будет скармливаться холодноводным морским животным которым требуется высокое содержание омега-3 жирных кислот (Dhont и Sorgeloos, стр. 251-271).
Обычный любитель, выкармливающий несколько десятков мальков гуппи или цихлид, может использовать все что угодно в качестве корма для науплий артемии. Я применяла, с хорошим результатом, пекарские дрожжи, сухой порошкообразный корм для мальков, муку бобовых, а также порошок спирулины.
Аэрация
Цисты артемии будут выклевываться и без аэрации, но науплиям требуется кислород. Я пользуюсь несильной аэрацией (с пузырями большого размера), так, чтобы цисты не выбрасывало выше уровня воды и чтобы науплии не теряли энергию на постоянную борьбу с течением. (Я заметила. Что науплии часто собираются у дна, где течение минимально.)
Температура
В большинстве рецептов для успешного выклева науплий артемии рекомендуется температура выше 26°C. При температуре от 26-30°C цисты выклевываются за ночь. При 18°C они также выклевываются, но процесс занимает 2-3 дня. При этом не все цисты выклевываются одновременно, особенно в холодной воде. (Думаю, многие любители выбрасывают доброкачественные цисты, если они не проклевываются быстро.)
Я советую просто держать инкубатор при комнатной температуре. В прохладной воде науплии артемии будут расти медленнее и проживут дольше. Это не так уж и плохо.
Соленость и pH
Выклев цист артеми лучше происходит в воде с низкой соленостью. Соленость? Превышающая соленость морской воды (3.5%) подавляет выклев (Dwivedi et al., стр. 175-183). Для инкубации артемии я использую соленость как в морской воде и pH 8 - 8.5.
Соль
Для выклева науплий артемии вполне подходит сочетание нейодированной столовой соли (NaCl) и небольшого количества питьевой соды (NaHCO3), которая помогает поднять pH выше 8. Тем не менее, я пользуюсь морской солью. Морская соль сама по себе стабилизирует pH на уровне 8.3, а также содержит больше питательных веществ (калий, магний, кальций, сульфаты, и пр.), что, вероятно, более благоприятно для науплий артемии а также способствует созданию более естественной бактериальной микрофлорв. Поскольку я многократно использую солевой раствор, затраты на приобретение морской соли незначительны. Двухкилограммовый мешочек соли, который я купила в свое время, служит мне вот уже 15 лет.
Кондиционер для воды
Я бы не стала выводить науплии артемии без применения подходящего кондиционера, способного нейтрализовать тяжелые металлы. Я применяю кондиционер в рекомендованной производителем дозировке.
Влияние токсичных металлов на выклев науплиев артемии
Тяжелые металлы, такие, как свинец, медь, ртуть и цинк, влияют на жизнедеятельность животных организмов и растений. Содержание металлов, которые высокотоксичны для человека, регулируется в законодательном порядке, поэтому наврядли вы обнаружите свинец или ртуть в водопроводной или питьевой воде. Однако цинк и медь, которые относительно безвредны для человека, иногда присутствуют в водопроводной воде в токсичных для водных организмов концентрациях (Walstad, стр. 91-113). Поэтому медь и цинк это те два тяжелых металла, о содержании которых аквариумисту стоит задумываться.
Выклев науплий артемии чрезвычайно чувствителен к содержанию тяжелых металлов (MacRae и Pandey, стр. 247-252). Как видно на Рис. 1, содержание всего 0.0064мг/л меди снижает выклев более чем на 50 процентов. То есть, в течение 72 часов в контроле выклюнулось 65 процентов цист, в то время как в воде с содержанием 0.0064мг/л меди выклюнулось только 30 процентов цист. Среднее содержание меди в муниципальной воде составляет 0.008мг/л ( <0.001 и вплоть до 0.3мг/л) (Walstad, стр. 85).
По сравнению с медью цинк менее токсичен, однако тоже способен в значительной степени препятствовать выклеву науплий артемии. На Рис. 1 видно, что 0.065мг/л цинка снижает выклев примерно на 50 процентов. То есть, в течение 72 часов в контроле выклюнулось 63 процентА цист, в то время как в воде с содержанием 0.065мг/л ЦИНКА выклюнулось 35 процентов цист.
Рисунок 1: Влияние меди и цинка на выклев артемии
Графики показывают влияние двух тяжелых металлов, в трех различных дозах, на выклев науплиев артемии. Каждая точка на графиках является усреднением по четырем измерениям. Измерения проводились в чашках Петри, содержащих 25 цист в 5мл среды. Цисты были гидрированы заранее путем вымачивания в течение 6 часов в холодной дистиллированной воде. В дальнейшем производился отбор качественных цист – плавающие на поверхности и негидрированные цисты в эксперименте не участвовали. Выклев цист в чашках Петри контролировался в течение 8 равных интервалов времени за общий период в 72 часа. (Thomas MacRae).
Влияние токсичных металлов на водные растения
Я впервые столкнулась с токсичностью металлов в водопроводной воде при экспериментах с аквариумными растениями. Bacopa caroliniana, населяющая болота Кароины с мягкой водой, хорошо росла в моей водопроводной воде. В противоположность бакопе, анахарис (Egeria densa) рос очень плохо. Вообще, растения происходящие из жестких вод особенно чувствительны к содержанию тяжелых металлов (Walstad, стр. 17, 18, 115). У меня закралось подозрение, что анахарис, происходящий из водоемов с жесткой водой, может быть чувствителен к содержанию цинка в моей водопроводной воде. В моей воде (из колодца) содержится 0.8мг/л цинка. Эта значительно больше, чем средний уровень 0.003мг/л чем в водопроводной воде (Walstad, стр. 85). По всей видимости, высокое содержание цинка в моей воде является результатом применения оцинкованных деталей в трубах и насосе, качающем воду из колодца.
Я решила проверить, действительно ли токсичность цинка является источником проблем с ростом анахариса. Хелатор металлов EDTA связывает цинк (и другие тяжелые металлы) очень крепко, в 790,000 раз крепче, чем кальций (Walstad, стр. 17). Поскольку токсическое действие проявляют только свободные, несвязанные металлы, EDTA способна нейтрализовать токсичное действие металлов. Я решила проверить, способен ли EDTA защитить анахарис от действия цинка, содержащегося в моей водопроводной воде. На Рис. 2 видно, что EDTA действительно защитил анахарис. Когда к водопроводной воде была добавлена EDTA у анахариса был нормальный рост. Средний прирост биомассы в трех банках с EDTA составил 130 процентов. Без EDTA у растений наблюдалось в среднем 8-процентное снижение биомассы.
Рисунок 2: Влияние EDTA на рост растений в водопроводной воде
Я использовала 2-литровые бутылки из под минеральной воды с отрезанными горлышками. В каждую бутылку я добавила чашку глинистой почвы (удобренной фосфатами) и чашку песка. Я посадила три 10-сантиметровых кусочка анахариса Egeria densa и сменяла водопроводную воду несколька раз пока не пройдет муть. Затем я осторожно добавила 1.5 литра водопроводной воды удобренной 0.5мг/л аммония (моя жесткая водопроводная вода содержит большое количество минералов, таких как кальций, калий и пр., а земля дает фосфаты и микроэлементы – железо, марганец, и т.д.). В три бутылки я добавил маточный раствор EDTA (0.2 M, pH 7.4) до концентрации 0.025 mM EDTA. Я предположила, что количество EDTA было достаточно для того? Чтобы нейтрализовать 0.8мг/л (0.012 mM) цинка. Три контрольные бутылки были подготовлены таким же образом, за исключением того, что EDTA не добавлялся. Бутыли стояли на балконе в течение 18 дней в июне. На фотографии показаны две типичные бутыли. Затем я достала растения, высушила их, взвесила, и рассчитала прирост биомассы.
Для того, чтобы убедиться, что именно цинк (а не какой-нибудь другой металл) является источником проблемы, я провела дополнительный эксперимент чтобы проследить, как анахарис отреагирует на увеличение содержания цинка в питательной среде. Результаты (Рис. 3) что рост анахариса подавлялся при уровне цинка близком к моей водопроводной воде (0.8мг/л). Даже при содержании цинка 0.1мг/л растения продемонстрировали замедление роста и укорочение длины листа. При содержании цинка 0.5 и 2.0мг/л рост затягивался, а листья бурели и распадались.
Рисунок 3: Влияние цинка на рост растений в питательной среде
Сперва я приготовила типичную питательную среду для растений, добавив в обессоленную воду различные маточные растворы. Окончательная концентрация питательных веществ (в мг/л) была: 1.6 N, 16 K, 30 Ca, 5.6 Mg, 7.5 S, 22 Na, and 60 HCO3. В каждую 2-литровую бутыль я добавила чашку глинистой почвы (удобренную фосфатами) и чашку песка. Я посадила 10-сантиметровые кусочки анахариса Egeria densa и добавляла и сменяла обессоленную воду пока не пройдет муть. Затем я осторожно добавила 1.5 литра питательной среды. Наконец, я добавила небольшие дозы маточного раствора цинка для получения концентрации в 0.1, 0.5, и 2.0 мг/л цинка. Фотографии показывают прирост биомассы, бутылки стояли на балконе в течение 16 дней в июне.
Нейтрализация токсичных металлов в солевом растворе для науплиев
Есть несколько способов нейтрализации токсичных металлов при инкубации артемии. Аквариумисты могут использовать для приготовления солевого раствора очищенную воду (обессоленную либо осотическую). Можно однако использовать водопроводную воду, в которую был добавлен кондиционер для аквариумной воды. EDTA также защищает науплии артемии от токсичных металлов, содержащихся в водопроводной воде.
И наконец, можно многократно использовать приготовленный однажды солевой раствор, оставшийся после того, как науплии были выведены и использованы. Старый солевой раствор, часто имеющий легкий желтоватый оттенок, содержит растворенные органические вещества. Растворенная органика является продуктом длительной переработки бактерпиями пищи, вносимой для науплиев, невыклюнувшихся цист, и пр. На Рис. 4 показаны два типичных инкубатора, один со свежеприготовленным солевым раствором, и другой со старым солевым раствором. В бутыли со старым солевым раствором выклюнулось большое количество здоровых рачков. В новом солевом растворе выклев науплиев произошел с задержкой и процент выклева был очень низким. Образцы воды, рассмотренные под фазовым микроскопом, выявили наличие большого количества мертвых или погибающих науплиев.
Рисунок 4: Свежий и старый солевые растворы
Одна из 1.5 литровых бутылей была заполнена свежим солевым раствором. Я заполнила другую бутылку старым солевым раствором (который использовался многократно для выклева артемии в прошлом году), немного использованного грунта, и старое платмассовое растение. К каждой бутыли я добавила 1/8 чайной ложки (680 мг) цист артемии и 1/8 чайной ложки (340 мг) измельченного корма для рыб. Бутыли хранились в в слабоосвещенной комнате при температуре около 18° - 21°C. На фотографии изображены бутылки через четыре дня. Выклев в свежем солевом растворе занял четыре дня и был очень низким. Выклев в старом солевом растворе занял два дня и был замечательным — достаточно науплиев, чтобы прокормить 50 - 100 мальков в течение недели. При ближайшем рассмотрении бутыли со старым солевым раствором видны здоровык, растущие рачки, похожие на красное облачко. У них ярко-красный цвет благодаря повышенному содержанию гемоглобина при низком содержании кислорода, обилии пищи и адекватном содержании железа (Versichele и Sorgeloos, стр. 231-246).
Органика, содержащаяся в старом солевом растворе связывает и нейтрализует тяжелые металлы, подобно тому, как это делает EDTA и органические коллоидные растворы, содержащиеся в кондиционерах аквариумной воды. На Рис. 5 показан инкубатор, а на Рис. 6 видны результаты эксперимента, когда я сравнивала действие старого солевого рпаствора и кондиционера аквариумной воды на токсичные металлы, содержащиеся в воде. В каждой из трех бутылей, содержащих старый соленый раствор либо кондиционер аквариумной воды выклюнулось в среднем по 10,000 науплиев. Даже добавки 20% старого солевого раствора было достаточно для того, чтобы нейтрализовать токсичность моей водопроводной воды. В бутылке, содержащей только свежий солевой раствор выклев был очень низкий - только 1000 науплиев.
Рисунок 5: «Эксперимент К» с артемией
Я заполнила четыре 0,6л. пластиковые бутылки 2 1/2 чашками (около 0.5л.) одного из следующих составов: (1) старый солевой раствор; (2) 20 процентов старого и 80 процентов свежего солевого раствора; (3) свежий солевой раствор с кондиционером аквариумной воды; и (4) свежий солевой раствор. Старый солевой раствор использовался в прошлом для выведенияартемии; он был прозрачен но имел желтоватый оттенок. Я добавила по 70мг цист артемии в каждую бутылку. The На фотографии видны гидрометр, воронка и другие материалы, которые я использовала для эксперимента.
Интересно, что взрослые артемии чрезвычайно выносливы к содержанию тяжелых металлов, гораздо больше, чем большинство рыб. Например, летальная доза меди и цинка для взрослых артемий составляет 2.3мг/л и 63мг/л, соответственно (Trieff, стр. 180). Науплии, которых убивает содержание уже 0.065мг/л цинка (Рис. 1), таким образом, в 1000 раз более чувствительны к содержанию цинка, чем взрослые особи.
Рисунок 6: Результаты «Эксперимента К» с артемией
К концу трехдневного эксперимента я определила жизнестойкость науплиев в каждой бутылке путем отделения по 1мл образца (предварительно хорошо перемешав воду) и подсчета живых рачков в стеклянной пипетке на 1мл. В бутылке справа со свежим солевым раствором был очень плохой выклев (около 1000 науплиев/бут.). В остальных трех бутылках было примерно по 10,000 науплиев.
Запуск культуры артемии
Я приготавливаю солевой раствор в банке емкостью в один галлон (около 3.78л), добавляя 1/2 чашки (130 г) аквариумной морской соли, заполняя ее водопроводной водой (Рис. 5). После того, как соль растворится, я добавляю кондиционер аквариумной воды.
Для получения недельного запаса артемии я наливаю некоторое количество этого солевого раствора в 11/2-литровую пластиковую бутыль. Затем я добавляю 1/8 чайной ложки без горки (340 mg) цист в 11/2-литровую бутыль. Несмотря на низкий (40%) процент выклева моих цист 16-летней давности, этого количества достаточно для выхода примерно 45,000 науплиев. Это довольно много. Применение большего, чем 1/4 или 1/8 чайной ложки количества цист является растратой и приводит к снижению выклева.
Кормление науплиев является важным моментом для моего метода. Оставшись без пищи науплии очень быстро теряют пищевую ценность. Если же их подкармливать, содержание протеина и пищевая ценность возрастает (содержание протеина возрастает с 47 процентов у науплий до 60 процентов у взрослых особей) (Gorospe и Nakamura, стр. 99-107). Я добавляю в бутылку-инкубатор примерно 1/8 чайной ложки сухово порошкового корма (разведенного в суспензию с небольшим количеством воды). На этом корме немедленно произойдет бактериальная вспышка и вода помутнеет (Рис. 4). Науплии будут питаться как самим кормом, также и бактериями.
Небольшого количества внесенного корма хватает надолго. Следует иметь в виду что морские соли, невыклюнувшиеся цисты и сами науплии выделяют питательные вещества и минералы, подпитывающие бактерии. После первоначального кормления обычно не бывает нужды в добавочном внесении корма. Питательные вещества в инкубаторе будут использоваьтся многократно в результате распада и бактериального роста. Если добавить чрезмерное количество корма инкубатор может оказаться перегруженным отходами что приведет к нарушению экологического баланса. Пока вода в инкубаторе обладает легкой замутненностью можно считать, что у науплиев достаточно бактериальной пищи. Возможно, бактерии не являются оптимальной пищей, но они достаточно хороши для первых 7 - 10 дней при культивации артемии.
Обслуживание инкубатора и кормление рыб
11/2-литровая бутылка, заполненная здоровыми, растущими науплиями (как в бутылке со старым солевым раствором, изображенной на Рис. 4) должна спокойно прокормить мальков в течение 7 дней. Дважды в день я сцеживаю здоровых питательных рачков, а оставшихся рачков продолжаю подращивать. Если, по мере роста мальков, потребность в корме увеличивается, иногда я добавляю второй инкубатор и пользуюсь двумя одновременно. Двух инкубаторов бывает вполне достаточно для выкармливания 100 мальков в течение 6 недель, до стадии, когда их можно переводить на другие корма.
После того, как науплии в инкубаторе израсходованы, легко запустить новую партию. Я отфильтровываю старый солевой раствор, переливая его в другой инкубатор (в качестве фильтра я применяю сачок для артемии либо коническую воронку, положив в нее кусок ткани). Ополоснув слегка инкубатор водой я наливаю старый солевой раствор обратно и добавляю 1/8 - 1/4 чайной ложки цист. При необходимости я добавляю немного водопроводной воды взамен испарившейся. Если старый солевой раствор кристально прозрачен, я добавляю также 1/8 чайной ложки корма. Если вода имеет легкое помутнение, я корма не добавляю.
Когда процесс подращивания мальков завершен, я отфильтровываю весь старый солевой раствор в канистру для хранения до следующего раза, когда мне понадобятся науплии артемии.
Зачастую в этой воде накапливается значительная концентрация аммиака (>10мг/л), но я научилась не обращать на это внимания. Я обнаружила, что после пары месяцев хранения аммиак пропадает. Более того, науплии, кажется, практически невосприимчивы к содержанию аммиака. Действительно, летальная доза (LC50 за 24 часа) аммиака составляет 840мг/л (Chen et al., стр. 329-336).
Обсуждение
Выводить науплиев артемии легко, нет необходимости в длительном и трудоемком процессе приготовления свежево солевого раствора. У меня цисты выводятся при различных условиях: слабое освещение, слабая аэрация, соленость в 1 - 31/2 процента, высокое содержание аммиака (>50 мг/л), и в широком температурном диапазоне (18 - 26°C). Цисты могут храниться в морозильнике по крайней мере в течение 16 лет. Науплии очень выносливы, за исключением чрезвычайной чувствительности к тяжелым металлам. Подозреваю, что плохой выклев науплиев зачастую является результатом именно наличия токсичных металлов а не плохого качества цист.
Многократное использование солевого раствора, применяемого для выклева, обладает тонкими преимуществами. Исследования показали что по мере культивации артемии происходят сильные изменения сопутствующей бактериальной микрофлоры (Gorospe и Nakamura, стр. 99-107). Вначале в культуре артемии преобладали бактерии Alteromonas, Vibrio, и Enterobacteriaceae, присущих для сверхсоленой среды естественного обитания артемии. Тем не менее, проведя 2 недели в более благоприятной среде (морская вода с изобилием пищи), в культуре артемии начинают преобладать бактерии рода Pseudomonas. Исследования показали, что в присутствии Pseudomonas продолжительность жизни рачков и их размер увеличиваются. Старый солевой раствор, который я использую для выклева цист артемии, предоставляет более благоприятную для науплиев бактериальную микрофлору, чем свежеприготовленный.
Список цитируемых работ
Chen, J. C.,K.J. Chen,andJ. M. Liao. 1989. Joint action of ammonia and nitrite on Artemia nauplii. Aquaculture 77: 329-336.
Dhont, J. and R Sorgeloos. 2002. Applications of Artemia. In: Abatzopoulos Th. J., J. A., Beardmore, J. S. Clegg, and P. Sorgeloos (eds.). Artemia: Basic and Applied Biology. Kluwer Academic Publishers, Boston, MA. pp. 251-271.
Dwivedi, S. N., S. K. R, Ansari, and M. Q. Ahmed. 1980. Mass culture of brine shrimp under controlled conditions in cement pools at Bombay, India. In: Persoone, G., R Sorgeloos, O. Roels, and E.Jaspers (eds.). The Brine Shrimp Artemia (Vol. 3). Universa Press, Wetteren, Belguim. pp. 175-183.
Gorospe, J. and K. Nakamura. 1996. Associated bacterial microflora in Artemia-rice bran culture. Israeli J. Aquaculture 48: 99-107.
Lavens, P., and R Sorgeloos. 2000. The history, present status and prospects of the availability of Artemia cysts for aquaculture. Aquaculture 181: 397-403.
MacRae, T. H., and A. S. Pandey. 1991. Effects of metals on the early life stages of the Brine Shrimp, Artemia: A developmental toxicity assay. Arch. Environ. Contam. Toxicol. 20: 247-252.
Trieff, N. M. 1980. Toxicity of metals, oils and other organics on Artemia. In: Persoone G., R Sorgeloos, O. Roels, and E. Jaspers (eds.). The Brine Shrimp Artemia (Vol. 1) Universa Press, Wetteren, Belguim. pp 253-262.
Versichele, D., and R Sorgeloos. 1980. Controlled production of Artemia cysts in batch cultures. In: Persoone, G., R Sorgeloos, O. Roels, and E. Jaspers (eds.). The Brine Shrimp Artemia (Vol. 3). Universa Press, Wetteren, Belgium, pp 231-246.
Walstad, D. 2003. Ecology of the Planted Aquarium (A Practical Manual and Scientific Treatise), Second Edition. Echinodorus Publishing, Chapel Hill, NC.
Синяя обезьяна в кокошнике - это круто, свирепо и гламурно в одном разе!
#17
Отправлено 02 января 2009 - 21:57
боян канешна (http://aquaportuz.bo...10-000-80-0#042), но все равно спасибо.
Ответить

Похожие темы
![]() |
Бытовые фильтры для водыАвтор Влад Губенко, 02 дек 2012 |
|
|
|
![]() |
Охлаждение воды в аквариумеАвтор x_denis, 26 мар 2009 |
|
|
|
![]() |
Артемия, провалившийся экспериментАвтор Allesgut, 14 авг 2009 |
|
|
|
![]() |
Эффект колебаний воды на днеАвтор Farruh, 26 янв 2013 |
|
|
|
![]() |
Тестирование водыАвтор ella, 19 окт 2009 |
|
|
|
![]() |
Смягчение водыАвтор .Clayot., 14 ноя 2009 |
|
|
|
Намагниченная артемияАвтор Леонов С.А., 13 сен 2012 |
|
|
Количество пользователей, читающих эту тему: 1
0 пользователей, 1 гостей, 0 анонимных
















